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浮游菌采样器的测试流程

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浮游菌采样器的测试流程

2021-08-23

测试方法

4.1  方法提要

   本方法采用计数浓度法,即通过收集悬游在空气中的性粒子于专门的培养基,经若干时间,在适宜的生长条件下让其繁殖到可见的菌落进行计数,从而判定洁净环境内单位体积空气中的活微数,以此来评定洁净室(区)的洁净度。

4.2  所用的仪器、设备和培养基

    a)浮游菌采样器;

    b)真空抽气泵;

    c)培养皿;

    d)培养基;

    e)恒温培养箱。

4.3  浮游菌采样器

    浮游菌采样器宜采用撞击法机理的采样器,一般采用狭缝式采样器或离心式采样器。

4.3.1  采用的浮游菌采样器须要有流量计和定时器。

4.3.2  狭缝式采样器的原理

   狭缝式采样器由附加的真空抽气泵抽气,通过采样器的缝隙式平板,将采集的空气喷射并撞击到缓慢旋转的平板培养基表面上,附着的活微粒子经培养后形成菌落,予以计数。

4.3.3  离心式采样器的原理

   离心式采样器由于内部风机的高速旋转,气流从采样器前部吸入从后部流出,在离心力的作用下,空气中的活微粒子有足够的时间撞击到专用的固形培养条上,经培养后形成菌落,予以计数。

4.3.4  狭缝式采样器的使用要点

    应严格按仪器说明书的要求进行操作。

4.3.4.1  校验

   采样器须按仪器的检定周期,定期对仪器作检定,以保证测试数据的可靠性。校验的项目有:定时器、转盘转速、流量计。

4.3.2  每次测试前应按说明书上的规定,先接通电源,启动真空抽气泵,然后调节流量计及定时器。

4.3.4.3 空气采样量根据需要选定。已知采样器的流量(L/min),设定采样时间(min),两者相乘即采样量(L)。

4.3.4.4  注意事项

4.3.4.4.1  采样口须用便于消毒及化学性能稳定的材料制造。

4.3.4.4.2  采样管严禁渗漏,内壁应光滑。

4.3.4.4.3  采样管的长度应根据测点的高度定,尽量减少弯曲。

4.4  真空抽气泵

4.4.1  真空抽气泵的排气量应与采样器匹配。

4.4.2   宜采用无油真空抽气泵,必要时可在非气口安装气体过滤器。

4.4.3  真空抽气泵安装的位置须适当,一般装在采样器下面。

4.5  培养皿

4.5.1  狭缝式采样器一般采用? 150mm×15mm、? 90mm×15mm、?65mm×15mm三种规格的硼硅酸玻璃培养皿。可根据所选用采样器选择合适的培养皿。

4.5.2  离心式采样器采用专用的固形培养条。

4.6  培养基

    普通肉汤琼脂培养基或其他药典认可的培养基。其配制方法见附录A(标准的附录)。


浮游菌采样器


4.7  恒温培养箱

    须定期对培养箱的温度计进行检定。

4.8  测试步骤

4.8.1  测试前仪器、培养皿表面须严格消毒。

4.8.1.1  采样器进入被测房间前先用消毒房间的消毒剂灭菌,用于100级洁净室的采样器宜一直放在被测房间内。

4.8.1.2  用消毒剂擦净培养皿的外表面。

4.8.1.3 采样前,先用消毒剂消毒采样器的顶盖、转盘以及罩子的内外面,采样结束,再用消毒剂轻轻喷射罩子的内壁和转盘。

4.8.1.4 采样口及采样管,使用前须高温灭菌。如用消毒剂对采样管的外壁及内壁进行消毒时,应将管中的残留液倒掉并晾干。

4.8.1.5  采样者应穿戴与被测洁净区域相应的工作服,在转盘上放入或调换培养皿前,双手用消毒剂消毒。

4.8.2  狭缝式采样器的采样程序

4.8.2.1 仪器经消毒后先不放入培养皿,开动真空泵抽气,使仪器中的残余消毒剂蒸发,时间不少于5min,并调好流量、转盘转速。

4.8.2.2  关闭真空泵,放入培养皿,盖上盖子后调节采样器缝隙高度。

4.8.2.3  置采样口于采样点后,依次开启采样器、真空泵,转动定时器,根据采样量设定采样时间。

4.8.3  培养

4.8.3.1  全部采样结束后,将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。

4.8.3.2  在30℃~35℃培养箱中培养,时间不少于48h。

4.8.3.3  每批培养基应有对照试验,检验培养基本身是否污染。可每批选定3只培养皿作对照培养。

4.8.4  菌落计数

4.8.4.1  用肉眼直接计数、标记或在菌落计数器上点计,然后用5~10倍放大镜检查,有否遗漏。

4.8.4.2  若平板上有2个或2个以上的菌落重叠,可分辨时仍以2个或2个以上的菌落计数。

4.8.5  注意事项

4.8.5.1  使用前仔细检查每个培养皿的质量,培养基及培养皿有变质、破损或污染的不能使用。

4.8.5.2  采取一切措施防止采样管的污染和其他人为对样本的污染。

4.8.5.3  对培养基、培养条件及其他参数作详细的记录。

4.8.5.4 由于细菌种类繁多,差别甚大,计数时一般用透射光于培养皿背面或正面仔细观察,不要漏计培养皿边缘生长的菌落,并须注意细菌菌落或培养基沉淀物的区别,必要时用显微镜鉴别。

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